2018—2020年四川省兽医系统实验室检测能力比对

为评估四川省兽医系统实验室检测能力和水平，2018—2020年四川省动物疫病预防控制中心组织全省21个地市（州）级兽医实验室开展了检测能力比对。结果显示：2018—2020年全省整体平均正确率分别为95.59%、97.09%和97.88%，说明四川省地市（州）级兽医实验室检测能力处于较高水平，能满足非洲猪瘟、禽流感等重大动物疫病检测需要。同时，部分实验室也反映出一些问题，如设备差、检测水平不高、检测报告不规范等。建议加大兽医实验室建设力度，更新完善检测设施设备；加强实验室技术人员培训，提升其检测能力和水平；同时继续推进兽医系统实验室考核工作，加强比对考核。     

贮运条件对草莓主要色素成分稳定性的影响

草莓在贮藏和运输期间会产生褪色现象,花青素含量逐渐减少。为研究光照时间、温度、pH、金属离子对草莓花青素的影响,探索合适的加工与贮运条件,在花青素含量保持一致的情况下设置4种反应条件,探讨光照时间、温度、pH、金属离子对草莓花青素的影响。草莓花青素在自然光下照射8 h,吸光度值下降25%,温度高于60℃后,吸光度值下降67%。当pH>7时,吸光度值下降85%,添加Na⁺、Mg²⁺后的色素提取液反应2 h后所测吸光度值分别保持在0.070和0.050左右,而添加Fe³⁺后测得的吸光度值下降87%。实验结果表明,草莓在贮运过程中应避光、低温、保持酸性条件,且避免与铁制品接触。     

优质棉中棉所127与高衣分材料杂交分离群体纤维产量和品质表型评价及典型相关分析

以纤维品质优异的陆地棉品种中棉所127为父本，以高衣分品系GH07-44为母本，构建了F₂和F_2:3分离群体，并对F₂和F_2:3群体的产量和纤维品质性状进行表型评价及典型相关分析。结果发现，分离群体各性状存在丰富的遗传变异和超亲分离，变异系数为1.15%～15.19%；F₂群体中铃重的变异系数最大，2个世代中纤维成熟度指数的变异系数均最小。超高亲比例为1.71%～66.86%，其中F_2:3群体马克隆值的超高亲比例最高，2个世代中最小的超高亲比例性状均为上半部平均长度。简单相关分析表明：衣分与马克_{隆值、成熟度指数呈极显著正相关，与上半部平均长度、长度整齐度指数呈极显著负相关；铃重与马克隆值呈极显著正相关，与F}2群体的成熟度指数呈极显著正相关，与F_2:3群体的成熟度指数呈显著正相关。典型相关分析表明，产量性状组与纤维品质性状组间存在相关关系，主要表现在衣分与上半部平均长度呈负相关、与马克隆值呈正相关，随着世代的增加，产量和品质性状的相关性降低，因此实现产量和纤维品质同步改良虽有一定难度但有可能实现。本研究筛选出2个世代衣分均超过43%且纤维品质较好的材料9个（马克隆值均值＜4.5、上半部平均长度均值＞30 mm），为棉花产量和纤维品质的同步改良提供了基础材料。     

宁夏地区潜在蒸散发变化特征及成因分析

根据宁夏地区1962-2017年11个国家级气象站的逐日气象资料,采用Penman-Monteith公式计算宁夏地区潜在蒸散发(Potential evapotranspiration,ET₀)日值系列,采用气候倾向率、Mann-Kendall突变检验、ArcGIS反距离权重空间插值、敏感性分析和贡献率等方法对宁夏地区ET₀时空变化特征及影响因素进行分析.结果表明:宁夏地区1962-2017年多年平均ET₀为1 073 mm,其中,中部干旱带最高(1 135 mm),引黄灌区次之(1 095 mm),南部山区最低(893 mm); 宁夏地区ET₀在1986年发生了突变,突变前以0.571 mm/a的幅度下降,突变后以0.109 mm/a的幅度递增,整个周期内,以0.523 mm/a 幅度递增,但变化幅度均不显著.ET₀对不同区域气象要素的敏感性不同,引黄灌区和中部干旱带对最高温度最敏感,敏感性系数分别为0.41和0.43,南部山区为相对湿度(-0.45); 不同气象要素对ET₀的贡献率不同,引黄灌区和南部山区主导因子是最低温度,中部干旱带是平均风速.突变前后,对引黄灌区、中部干旱带和南部山区ET₀贡献率最高的气象要素分别由平均风速、相对湿度和最低温度,变为相对湿度、平均风速和最低温度.     

贪食迈阿密虫(M.avidus)对4种海水养殖鱼类组织匀浆液的趋化性

通过对贪食迈阿密虫(M. avidus)对4种养殖鱼类组织匀浆液的趋化特性进行研究,以探讨贪食迈阿虫对养殖鱼类的侵染特点。试验结果显示,贪食迈阿密虫对大黄鱼、大菱鲆、黄姑鱼、鲈鱼的眼、脑、脑脊液匀浆液有强烈的趋化效果(P<0.01),对皮肤黏液、鳃、肝、肌肉、肾组织匀浆液的趋化性较弱(P>0.05);对不同鱼类组织匀浆液对贪食迈阿密虫的趋化诱导差异比较结果推测,贪食迈阿密虫对宿主具有一定的选择性。本研究有助于深化贪食迈阿密虫致病性的认识,并为海水养殖鱼类盾纤虫病的预防提供参考资料。     

花生壳黄酮的提取纯化工艺

本文采用酶法预处理结合超声波辅助提取的方式，最大程度地提高了花生壳总黄酮的得率，并优化大孔树脂纯化工艺，提高了有效成分的纯度。花生壳黄酮的最佳提取工艺为：花生壳粉与水混合，半纤维素酶与木聚糖酶按1:1（m/m）复配，用量0.25‰，50℃酶解30 min后，按料液比1:20（m/V）加入乙醇至终浓度60%，于功率1000 W，55℃超声波辅助提取60 min，花生壳总黄酮的得率约为2.5%。选用D101型大孔树脂，上样缓冲液为pH 5.0的60%乙醇溶液，洗脱液为pH 10.0的70% 乙醇溶液，上样与洗脱流速为0.75 BV/h和1.5 BV/h。纯化后的花生壳总黄酮和木犀草素的纯度分别为10.54%和5.85%，提高了90%和120%。     

甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球作为口蹄疫病毒核酸疫苗递送载体的特性评价

旨在对制备的甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly （D，L-lactide-co-glycolide），PLGA]纳米微球作为口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）核酸疫苗递送载体进行评价。采用西佛碱反应和元素分析制备具有一定取代度的甘露糖修饰的壳聚糖衍生物（mannose modified chitosan，MCS），然后，经双重乳化挥发法制备得到甘露糖修饰的壳聚糖PLGA纳米微球（MCS-PLGA-NPs）。采用纳米粒径仪检测MCS-PLGA-NPs粒径分布和表面电势（zeta）、扫描电镜考察其形态、琼脂糖凝胶电泳观察其对质粒的吸附和吸附质粒后抵抗核酸酶降解能力、CCK-8法检测MCS-PLGA-NPs的细胞毒性、激光共聚焦观察巨噬细胞对MCS-PLGA-NPs-质粒DNA复合物的摄取、荧光显微镜和Western blot验证MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA在细胞中的表达。元素分析结果表明，成功制备了取代度为5%~10%的MCS。纳米粒径测定和扫描电镜结果表明，MCS-PLGA-NPs的zeta为正值、粒径分布均匀且形态规则呈球形。琼脂糖凝胶电泳结果显示，MCS-PLGA-NPs吸附质粒的能力随着其质量的增加而增强并且可以在一定程度上抵抗核酸酶降解质粒DNA。在细胞毒性试验中，不同浓度的MCS-PLGA-NPs与RAW264.7细胞共孵育24 h后，细胞存活率仍在85%以上。在细胞摄取试验中，用激光共聚焦显微镜可以明显观察到质粒DNA结合到纳米微球表面被RAW264.7细胞摄取。荧光显微镜和Western blot试验证明MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA可以在细胞中进行表达。综上表明，本研究成功制备了MCS以及具有递送核酸疫苗能力的MCS-PLGA-NPs，为FMDV核酸疫苗的递送研究提供了新的方向和见解，也为该递送载体携带特定抗原靶向抗原递呈细胞表面甘露糖受体以及应用于动物免疫的研究奠定基础。     

Molecular Characterization of the Von Willebrand Factor Type D Domain of Vitellogenin from Takifugu flavidus

The von Willebrand factor type D (VWD) domain in vitellogenin has recently been found to bind tetrodotoxin. The way in which this protein domain associates with tetrodotoxin and participates in transporting tetrodotoxin in vivo remains unclear. A cDNA fragment of the vitellogenin gene containing the VWD domain from pufferfish (Takifugu flavidus) (TfVWD) was cloned. Using in silico structural and docking analyses of the predicted protein, we determined that key amino acids (namely, Val¹¹⁵, ASP¹¹⁶, Val¹¹⁷, and Lys¹²²) in TfVWD mediate its binding to tetrodotoxin, which was supported by in vitro surface plasmon resonance analysis. Moreover, incubating recombinant rTfVWD together with tetrodotoxin attenuated its toxicity in vivo, further supporting protein–toxin binding and indicating associated toxicity-neutralizing effects. Finally, the expression profiling of TfVWD across different tissues and developmental stages indicated that its distribution patterns mirrored those of tetrodotoxin, suggesting that TfVWD may be involved in tetrodotoxin transport in pufferfish. For the first time, this study reveals the amino acids that mediate the binding of TfVWD to tetrodotoxin and provides a basis for further exploration of the molecular mechanisms underlying the enrichment and transfer of tetrodotoxin in pufferfish.     

利用HPLC-ICP-MS方法测定中华绒螯蟹不同形态砷的残留量

采用高效液相色谱串联电感耦合等离子体质谱仪(HPLC-ICP-MS)测定中华绒螯蟹可食部位6种砷形态的残留量。经过前处理、提取和脱脂后,通过色谱柱、流动相、pH和流速等参数调节,筛选得到最优化的分离和检测条件。结果表明,6种砷形态的混合标准溶液在质量浓度0~50 μg/L范围时,均呈现良好的线性关系,其R²达到0.999,检测限为0.0060~0.0912 μg/kg,定量限为0.020~0.304 μg/kg。在样品中添加0.5、5、50 μg/L浓度水平,回收率良好,范围是70%~120%,相对标准偏差(RSD)均<5%,方法精密度与重复性均良好。本方法为中华绒螯蟹可食部位砷形态残留量建立了有效检测方法,为水产品砷残留快速检测提供技术支撑。     

Multiplication of the Recombinant Strain Re-7 of Avian Influenza Virus Subtype H5 in MDCK Cells

This study was conducted to explore the multiplication pattern of the recombinant strain Re-7 of avian influenza virus subtype H5 in Madin Darby Canine Kidney(MDCK) cells and to determine the optimal multiplicity of infection(MOI) and the optimal time for virus harvest. The recombinant strain Re-7 was inoculated at different MOIs into MDCK cells grown in serum-free medium in 100 L bioreactors for replication. Then,the hemagglutination(HA) titer, 50% tissue culture infectious dose(TCID50) and 50% embryo infectious dose(EID50) of culture medium were measured once every 12 h from 24 h after virus inoculation to determine the optimal MOI. After that, virus was inoculated at the optimal MOI deter-mined above into MDCK cells for large-scale virus replication to determine the optimal time for virus harvest. The results showed that the optimal MOI was 10~(-2), and the optimal time for virus harvest was 60 h after inoculation. Under these conditions, the HA titer, TCID_(50) per 1 m L and EID50 per 0.1 m L were increased to 1∶102 4, 10~(7.33) and 10~(6.83), respectively. This study provides relatively stable parameters for large-scale production of the recombinant strain Re-7 of avian influenza virus subtype H5.